本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种新城疫病毒疫苗。制备新城疫病毒疫苗的蛋白，包括新城疫病毒的F蛋白和新城疫病毒的HN蛋白，其中，编码F蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1(基因Ⅶ型)或SEQID NO.3(基因Ⅱ型)所示，编码HN蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2(基因Ⅱ型)或SEQ ID NO.4(基因Ⅶ型)所示。该蛋白适用于真核细胞表达系统，简化了新城疫病毒疫苗活性成分制备的工艺，同时降低了成本。并且，该蛋白具有广谱抗原性，可以实现良好的交叉保护效果。