本发明涉及一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法，包括：(1)制备羧基化Mn‑ZnS量子点荧光纳米微球；(2)制备Mn‑ZnS量子点纳米微球‑氯霉素荧光探针；(3)氯霉素荧光试纸条构建和检测方法；(4)将步骤(2)的Mn‑ZnS量子点‑氯霉素荧光探针与待测样品混合滴加于样品垫上；(5)4‑5min后根据试纸条上的荧光强度得到检测结果。本发明提高了荧光探针的稳定性和灵敏度；一步合成的具有羧基和氨基修饰的Mn‑ZnS量子点，提高了该量子点在水相溶剂中的分散性和稳定性，增加了Mn‑ZnS量子点偶联氯霉素抗体后荧光探针的灵敏度和稳定性，氯霉素荧光试纸条稳定性好，灵敏度高，商业应用价值好。