本发明涉及化合物分离纯化技术领域，具体公开一种甲基甘氨酸二乙酸三钠盐的分离纯化方法。所述甲基甘氨酸二乙酸三钠盐的分离纯化方法包括以下工艺步骤：a、将甲基甘氨酸二乙酸三钠盐的合成反应液进行浓缩，然后控制所得浓缩液的温度为50℃‑60℃，向浓缩液中加入温度为50℃‑60℃的醇溶剂，得到混合溶液；b、将混合溶液加热至所述醇溶剂的回流温度，再以5℃/h‑25℃/h的降温速率进行降温析晶，降温析晶的终点温度为5℃‑25℃，过滤分离晶体，干燥，得到甲基甘氨酸二乙酸三钠盐。本发明提供的甲基甘氨酸二乙酸三钠盐的分离纯化方法可得到兼具高纯度和高收率的甲基甘氨酸二乙酸三钠盐，具有极高的应用推广价值。