本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种调节蛋白类药物半乳糖基化水平的CHO细胞培养方法。该培养方法包括基础培养阶段和补料培养阶段，在补料培养阶段，除补加补料培养基外，还补加L‑半胱氨酸；L‑半胱氨酸可以在补料培养阶段，与补料培养基同时补加，补加量为1.2～4.8mmol/L；还可以在基础培养阶段和补料培养阶段分别补加，且在基础培养阶段补加量为0.3～2.0mmol/L，在补料培养阶段补加量为0.6～1.8mmol/L。本发明的方法不仅可以通过调整半胱氨酸的补料量，提高蛋白类药物的半乳糖基化水平，而且不改变药物的其他关键质量属性。本培养方法操作简单，适合大规模生产。