本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的L‑天冬酰胺酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)野生型的L‑天冬酰胺酶基因，利用易错PCR技术对野生型L‑天冬酰胺酶基因进行随机突变，得到L‑天冬酰胺酶突变体Y55S/I203V、H8R/Y55S/I203V，及其编码基因asnm1、asnm2，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的L‑天冬酰胺酶。