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公开(公告)号：CN118562749A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410341833.8
申请日：2024-03-25
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及了一种酶活性提升的黄素单加氧酶突变体及其制备与应用。通过全基因合成获得来自粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的野生型黄素单加氧酶基因，利用关键位点氨基酸残基定点突变技术对野生型黄素单加氧酶基因进行改造，得到黄素单加氧酶突变体Q89H及其编码基因spfmom，重新构建重组质粒，并实现了其在大肠杆菌中的高效表达，突变体的相对酶活为野生型的130％，催化蒜氨酸的产率到达22.86％，具有重要的工业价值。
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公开(公告)号：CN115717135B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202210992314.9
申请日：2022-08-18
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术邻域，具体涉及一种酶活性和热稳定性提升的β‑木糖苷酶突变体及其制备应用。本发明通过分子生物技术手段获得克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)野生型的β‑木糖苷酶基因，利用易错PCR技术对β‑木糖苷酶基因进行随机突变，得到β‑木糖苷酶突变体S51L和其编码的基因xylm，重新构建重组质粒，并实现了其在大肠杆菌、毕赤酵母菌和枯草芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得酶活力和热稳定性能提高的β‑木糖苷酶。
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公开(公告)号：CN113604457B
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202110915041.3
申请日：2021-08-10
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的L‑天冬酰胺酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)野生型的L‑天冬酰胺酶基因，利用易错PCR技术对野生型L‑天冬酰胺酶基因进行随机突变，得到L‑天冬酰胺酶突变体Y55S/I203V、H8R/Y55S/I203V，及其编码基因asnm1、asnm2，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的L‑天冬酰胺酶。
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公开(公告)号：CN114317469A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111516213.6
申请日：2021-12-08
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P13/04 , C12R1/19 , C12R1/84
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活性提升的黄素单加氧酶突变体及其制备与应用。通过全基因合成来自大蒜(Allium sativum)的野生型黄素单加氧酶基因，利用易错PCR技术对野生型黄素单加氧酶基因进行随机突变，得到黄素单加氧酶突变体N91G，及其编码基因asfmom，重新构建重组质粒，并实现了其在大肠杆菌和毕赤酵母中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得活性进一步提高的黄素单加氧酶。
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公开(公告)号：CN118879691A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202410650601.0
申请日：2024-05-24
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/65 , C12N15/12 , C12N15/55 , C12N9/22 , C07K14/435
摘要： 本发明属于微生物与基因工程技术领域，具体涉及一种突变启动子PLC2及其应用。启动子PLC2的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，本申请通过在乳糖诱导启动子的基础上添加CRE元件，并对CRE序列进行突变，利用葡萄糖介导的CCR效应实现负调控蛋白阻滞RNA聚合酶的转录功能，使得添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达。本发明提供的启动子PLC2，在添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达，当葡萄糖的添加量为1.5％时，在12h和24h测得表达量相比于原始启动子Plac分别下降66％和63％。与此同时，在不添加葡萄糖只添加IPTG的情况下，PLC2仍然保持与原始启动子Plac相当的转录水平。
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公开(公告)号：CN115717135A
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202210992314.9
申请日：2022-08-18
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术邻域，具体涉及一种酶活性和热稳定性提升的β‑木糖苷酶突变体及其制备应用。本发明通过分子生物技术手段获得克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)野生型的β‑木糖苷酶基因，利用易错PCR技术对β‑木糖苷酶基因进行随机突变，得到β‑木糖苷酶突变体S51L和其编码的基因xylm，重新构建重组质粒，并实现了其在大肠杆菌、毕赤酵母菌和枯草芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得酶活力和热稳定性能提高的β‑木糖苷酶。
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公开(公告)号：CN112111472B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202011029392.6
申请日：2020-09-27
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的β‑木糖苷酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)野生型的β‑木糖苷酶基因，利用易错PCR技术对野生型β‑木糖苷酶基因进行随机突变，得到β‑木糖苷酶突变体E455G，及其编码基因xylm，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的β‑木糖苷酶。
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公开(公告)号：CN112111472A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202011029392.6
申请日：2020-09-27
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的β‑木糖苷酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)野生型的β‑木糖苷酶基因，利用易错PCR技术对野生型β‑木糖苷酶基因进行随机突变，得到β‑木糖苷酶突变体E455G，及其编码基因xylm，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的β‑木糖苷酶。
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公开(公告)号：CN113604445B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN202111068005.4
申请日：2021-09-13
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的酪氨酸酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)野生型的酪氨酸酶基因，利用易错PCR技术对野生型酪氨酸酶基因进行随机突变，得到酪氨酸酶突变体G43R，及其编码基因tyrm，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的酪氨酸酶。
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公开(公告)号：CN113604457A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110915041.3
申请日：2021-08-10
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的L‑天冬酰胺酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)野生型的L‑天冬酰胺酶基因，利用易错PCR技术对野生型L‑天冬酰胺酶基因进行随机突变，得到L‑天冬酰胺酶突变体Y55S/I203V、H8R/Y55S/I203V，及其编码基因asnm1、asnm2，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的L‑天冬酰胺酶。
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