本申请属于组织培养技术领域，具体涉及一种解除牡丹组培苗顶芽休眠的处理方法。该方法包括：采集外植体并诱导萌发、增殖培养、诱导生根、诱导形成顶芽和解除休眠等步骤。发明人认为现有牡丹组培苗移栽成活率低的主要原因有：一是组培苗生诱导根后，存在顶芽休眠现象，导致地上部停止生长；二是现有牡丹组培苗的生根率效果虽有一定改进，但根系不发达，而随着顶芽休眠、营养需求减少，又进一步导致生根后根系生长活力变弱，进而造成移栽后成活率较低。针对上述问题，发明人一方面通过相关培养基优化、培养条件优化来改善诱导生根效果，另一方面，通过环境调控来解除顶芽休眠、提高生长旺势，进而促进根系萌发和生长，从而最终提高移栽成活率。