本发明属光学滤光片领域，尤其涉一种用于多色荧光检测的多色荧光检测用多通带消偏振二向分色滤光片，由基底及高陡度消偏振多通带二向分色镜膜系构成；膜系结构为：S｜［（aL HL bH LH aL）^m］｜A；或S｜［（aL HLH bL HLH aL）^m］｜A；其中：S为玻璃基底；A为空气；H为高折射率材料；L为低折射率材料；H、L均为光学厚度为λ0/4的膜层；a为峰位系数，b为通带消偏振系数，m为基础膜系的总体循环个数。本发明在45°入射时具有高陡度、消偏振的光谱特性且各适配波段位置和消偏振类型可以灵活调整。