本发明提供一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器的外泌体检测方法，包括：（1）外泌体‑信号探针结合体系，（2）S‑EWFB检测分析体系。本发明对信号探针进行双标记，一端修饰信号分子，一端修饰疏水分子，通过疏水相互作用将双标记的信号探针嵌入外泌体膜上，使得一个外泌体表面连接多个信号分子，进一步利用光纤表面修饰了特异性适配体的倏逝波传感平台对反应样品进行荧光信号的实时监测与分析。本发明以光纤倏逝波荧光检测仪为终端检测平台，实现了对外泌体的简单、快速、实时、高灵敏的连续定量检测。不仅如此，本发明提供的光纤检测平台具有良好的表面再生能力。