本发明涉及一种甘草种子蛋白的超声波辅助制备方法及其用途，该方法以药用甘草种子为原料，采用碱提酸沉超声波辅助提取结合响应面优化法制备其蛋白，将甘草种子粉碎、并过筛分离杂质后石油醚脱脂，待其自然风干后，以碱溶液为溶剂进行提取，再进行酸沉、水洗沉淀，经冷冻干燥制成甘草种子蛋白粉末。采用响应面法进行优化，以超声功率、超声时间、超声温度及料液比作为影响因素，设计四因素三水平的响应面分析试验，得到甘草种子蛋白平均含量110.47 mg/g，经红外光谱显出典型的蛋白吸收峰，具有α螺旋结构；扫描电镜显示，甘草种子蛋白呈现出不规则的块状和厚薄较均匀的片状结构，同时该蛋白被验证具有一定的抗氧化活性。为甘草种子的开发利用及其抗氧化肽的制备提供参考。