本发明涉及酶工程领域，公开了一种基于纳米双醛淀粉载体的固定化CALB制备方法。该固定化酶制备方法如下：首先以蜡质玉米淀粉通过预糊化法制备纳米淀粉颗粒，并通过真空干燥去除纳米淀粉颗粒的水分，再将干燥后的纳米淀粉颗粒通过高碘酸钠氧化，得到双醛淀粉纳米颗粒。然后，以共沉淀法制备纳米Fe3O4，将制备得到的双醛淀粉纳米颗粒与制备出的纳米Fe3O4结合得到复合载体。再将CALB通过交联法固定到制备出的复合载体上，得到一种基于纳米双醛淀粉载体的固定化CALB。且该方法具有较好的酶活力回收率和较高的重复使用性。