本发明提供了一种氨基酸酰胺化果胶的制备方法。其主要制备路线是：以氨基酸为改性剂，木瓜蛋白酶为催化剂，在超低温条件（‑30℃~0℃）及水/有机两相混合溶剂中催化氨基酸和果胶发生酰胺化反应，从而制备氨基酸酰胺化果胶。本发明制备的氨基酸酰胺化果胶可以在不添加其他固形物（如蔗糖）的条件下形成凝胶，且所需的钙离子浓度范围较原料果胶更低。同时，与原料果胶相比，酰胺化果胶粘度更大，且在相同的凝胶条件下可以形成更高持水力的凝胶，这有助于提高果胶作为食品和医药领域中的应用潜力。