本发明提供了一种反映免疫突触相关信号蛋白的荧光素酶互补系统质粒和稳转细胞株及其在CAR修饰细胞生物学活性测定中的应用。该质粒包括含有ICAM‑1基因序列和pGL3‑Control质粒上的荧光素酶序列Nluc的质粒、含有SHP2基因序列和pGL3‑Control质粒上的荧光素酶序列Cluc的质粒，以及含有CD19基因序列的质粒。该稳转细胞株为293‑IS‑CD19，其是通过将上述质粒转染至人胚胎肾细胞HEK‑293细胞获得，稳定整合ICAM‑1‑Nluc与Cluc‑SHP2报告基因以及CD19抗原。该细胞株可以实时反应免疫突触形成能力，测定过程简单，结果准确，可用于基于免疫突触形成能力的CAR修饰细胞生物学活性评估中，使得评估方法简单，耗时很短，检测费用低，测定结果的稳定性，可有利于生物学活性药物的质量控制和临床应用，具有较高的应用价值。