本发明公开了一种用于检测克氏原螯虾白斑综合征病毒(WSSV)的金纳米探针及其制备方法和应用。一种用于检测白斑综合征病毒的金纳米探针的制备方法，由抗WSSV VP664多克隆抗体与表面修饰protein A的金纳米颗粒共同孵育，然后纯化制备得到所述的金纳米探针。一种非疾病诊断目的的检测对虾白斑综合征病毒的方法，包含以下步骤：(1)利用本发明所述的金纳米探针标记WSSV；(2)暗场显微镜观察样品。本发明建立的金纳米探针结合暗场显微镜检测体系操作简单、检测快速、对设备要求低且不需要专业人员操作，可用于克氏原螯虾等虾类养殖关键环节进行现场白斑综合征病毒快速定量定性检测。