本发明公开了一种双信号探针、检测大肠杆菌的试纸条及应用。本发明首次在免疫层析试纸条(ICTS)检测中构建了一种基于亚甲基蓝嵌入的锆基金属‑有机骨架(UIO@MB)作为捕获载体和双信号探针。免标记、有色的UIO@MB可以摆脱传统探针一系列麻烦的标记步骤和固有的缺点实现直接捕获细菌，在检测线上形成可见条带，并且通过引入Al3+激发高强度荧光响应，产生绿色荧光带。设计的免标记和双信号ICTS(UIO@MB‑LDICTS)在比色和荧光模式下的检测限均为103CFU/mL，比传统的基于金纳米颗粒的ICTS灵敏度高100倍。发明的UIO@MB‑LDICTS展示了一种通用设计，为对多种病原体的易感性进行现场分析提供了前瞻性策略。