本发明涉及一类应用于溶酶体超分辨荧光成像的近红外自闪荧光染料及其合成方法与应用，该类荧光染料通过2‑氨基吡啶衍生物对罗丹明700的羧酸位置进行修饰，从而大幅度增加染料罗丹明700的荧光暗态的比例。本发明中涉及的近红外荧光自闪染料在pH>5.0水体系中几乎是以无荧光态的螺酰胺形式存在，进而使其在细胞内偏酸环境的溶酶体中有少量的开环荧光态形式，可以实现细胞内溶酶体的近红外免洗成像的定位效果。除此之外，该类荧光染料还具有荧光态与暗态结构之间的可逆平衡，从而使得染料可以在酸性的溶酶体中自发闪烁的性能，实现细胞内溶酶体的免洗超分辨荧光成像。