本发明提供了一株分泌稻瘟灵单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫化学技术领域。本发明将稻瘟灵的完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化，通过颈背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠。首次免疫(100μg/只)用完全弗氏佐剂进行乳化，多次加强免疫用不完全弗氏佐剂，最后一次用稻瘟灵完全抗原冲刺免疫(腹腔注射)。将高效价和高灵敏度小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，采用选择培养基，筛选出两种细胞融合后的杂交细胞；再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞，并进行多次亚克隆，最终得到一株单克隆抗体杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对稻瘟灵具有较好的检测灵敏度，可以用于稻瘟灵的残留检测。