本发明公开了一种动物心肌酶解物及其制法和在制备改善心肌功能产品中的应用。该酶解物的制备方法包括以下步骤：动物心脏，绞成肉糜，反复冷冻和解冻；所得肉糜热处理灭酶，加水控温调节pH值，加入蛋白酶酶解4～10；酶解结束后将反应体系热处理灭酶，离心收集上清液，适度浓缩后喷雾干燥或冷冻干燥，得到动物心肌酶解物。本发明得到的酶解物小分子肽段占比高，可直接作用于心肌细胞，显著提高心肌细胞抵御损伤的能力。本发明得到的酶解物在小鼠阿霉素心衰模型中保护小鼠心脏，效果显著，减少了阿霉素给小鼠心脏带来的损伤，有良好的市场开发与应用前景。