本发明公开了一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano‑PCR检测方法，属于分子生物学技术领域。本发明公开的一种同时检测GPV、GoAstV和GPMV的Nano‑PCR检测方法，根据GPV、GoAstV和GPMV的保守基因序列设计了特异性引物，建立了一种能够同时检测三种病毒的特异性强、敏感性高的Nano‑PCR检测方法；对GPV、GoAstV和GPMV检测的敏感性是普通PCR的10到100倍，且对AIV、FAdV和TMUV均无扩增，具有较好的特异性，可用于GPV、GoAstV和GPMV的临床检测。