本发明公开了一种二萜类衍生物及其制备方法与镇痛药物、小脆柄菇发酵得物及其乙酸乙酯萃取液，属于医药化学技术领域。该二萜类衍生物为化合物1至化合物10中的任意一种，上述二萜类衍生物的制备方法是将经小脆柄菇的发酵得物经乙酸乙酯萃取后所得的乙酸乙酯萃取液进行硅胶柱层析，随后再经过中压液相色谱分离，将所得的子组分按不同的洗脱和分离方式进行制备，所得的二萜类衍生物纯度高，具有一定的镇痛活性。此外，本申请的制备原料包括上述二萜类衍生物的镇痛药物具有较高效的镇痛效果，其镇痛活性与临床广泛使用的镇痛药物吗啡相当。