本发明提供了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp，涉及植物生物技术及基因工程领域。本发明成功分离并克隆了一种愈伤组织特异强启动子Pcsp，克服了现有技术利用组成型启动子驱动标记基因，表达活性不高或特异性较低的不足。本发明还提供了在本启动子Pcsp的应用。该Pcsp启动子可以用来构建植物遗传转化和基因编辑载体，可以驱动标记基因、Cas核酸酶编码基因或特定功能基因在愈伤组织中特异高水平表达，表达水平约为组成型启动子P35S所驱动GUS的4倍；不影响转基因阳性植株正常生长的情况下，在植株组织器官中不表达，具有特异性，更安全，可解决生物安全方面的担忧；在基因编辑实验中周期短、成本低、灵敏度高，在植物遗传转化和基因工程领域具有很好的应用前景。