本发明涉及一种呼吸性粉尘分离效能测试粒子浓度不确定度分析方法，属于粉尘监测领域。该方法包括以下步骤：S1：在静态箱内生成呼吸性粉尘预分离装置分离效能测定用的单分散测试粒子；S2：建立单分散测试粒子的浓度及浓度不确定度计算模型；S3：计算单分散的测试粒子浓度测量结果的不确定度分量、合成标准不确定度和合成扩展不确定度。对呼吸性粉尘预分离装置分离效能测定用静态箱粒子浓度的测量过程进行不确定度分析，提出了降低误差的途径，为呼吸性粉尘预分离器分离效能的准确、高效评定提供了依据。