本申请公开一种双键后交联生物瓣膜材料及其制备和应用，包括：(1)将生物材料浸泡于含功能单体的溶液中进行物理渗透；所述功能单体具有至少一个氨基、至少一个碳碳双键和至少一个功能性基团；(2)向步骤(1)的体系中加入醛基交联剂，进行共交联；(3)将经步骤(2)处理后的生物材料与引发剂接触，引发双键聚合。本申请的方法在醛基交联时引入功能单体进行共交联，共交联的同时引入碳碳双键，作为二次交联的基础，通过两次交联制备交联生物材料，可提高生物材料的交联度，改善生物材料的机械性能。本申请在共交联过程中，功能单体引入双键的同时也可封闭生物材料上的部分残留醛基，改善生物材料的抗钙化和抗凝血性能，同时也可进一步提高交联效率。