本发明提供一种便携式核酸检测仪，包括：卡盒，包括试剂盒、滑块、用以扩增反应的反应管；试剂盒设有若干容腔、若干通道、出液口；一容腔底部与一通道连通；反应管顶端与出液口连通；滑块滑动连接于试剂盒；滑块设有过渡腔、注射器结构；注射器结构包括外筒、活塞；位移机构，用以驱动滑块相对试剂盒滑动；活塞驱动机构，包括相连的第一驱动件、推拉杆；推拉杆用以插入外筒内并卡接于活塞；第一驱动件用以驱动推拉杆带动活塞于外筒内运动，以对过渡腔进行抽液或推液，使得卡盒进行核酸提取。本发明还提供一种核酸检测方法。检测仪本体省去机械臂移液结构，在卡盒内部完成一系列的核酸提取操作，整体结构简单小巧、便于搬运。