本发明涉及一株分泌氟吡呋喃酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于免疫检测技术领域。本发明所述的分泌氟吡呋喃酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株于2022年03月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.45109，本发明所得的杂交瘤细胞株属于单克隆细胞株。本发明提供的交瘤细胞株分泌的氟吡呋喃酮单克隆抗体可以用于免疫分析检测，其在氟吡呋喃酮的检测中表现出了较好的检测灵敏度和特异性，IC50值为0.656ng/mL，对氟吡呋喃酮类似物交叉率小于1％。