一种β‑内酰胺酶耐药基因blaZ的荧光PCR检测试剂盒及其应用，属于生物技术领域。本发明一方面提供了一种β‑内酰胺酶耐药基因blaZ的荧光PCR检测试剂盒，另一方面提供了该试剂盒的应用及应用方法。本发明具有以下有益效果：针对β‑内酰胺酶耐药基因blaZ特异性设计了一对引物和一条探针，特异性程度高，检测结果准确；本发明试剂盒组分和配比合理，操作简单、使用方便，最大程度上减少交叉污染；本发明简化了检测流程，与传统培养分析的方法相比减少了两天时间，大大缩短了检测周期。