本发明提供了一种化学生物提炼植物渣油中甾醇的方法，先使用低剂量氢氧化钾‑甲醇溶液先进行酯交换预处理；然后再进行酶处理，分解可皂化物以降低皂化值；再通过分子蒸馏将甾醇富集后进行重结晶、乙醇漂洗、净化精制，干燥后得到精制甾醇。本化学生物提炼甾醇方法采用了先酯交换、后蒸馏结晶的工艺，与主流的皂化络合法比较，甾醇收率提高10％以上，甾醇含量提高5％以上，使甾醇收率达到92％以上，精制甾醇含量高达95％以上，且省去了皂化和水洗的粗提工序，使甾醇通过富集以及乙醇溶剂重结晶精制过程中充分得以回收，从而降低了甾醇的损失，并简化了工艺流程，实现了植物渣油资源化利用。