本发明提供了一种测定硫化汞或含硫化汞物质中汞经口绝对生物利用度的方法，属于生物利用度测定技术领域。本发明通过克服从样品采集、前处理和检测过程中可能产生的汞污染干扰因素，建立了基于体内保留汞量和尿液排泄汞量为基础的口服硫化汞或含硫化汞物质的汞绝对生物利用度(吸收率)检测方法，该方法为硫化汞和含硫化汞传统药物中汞的暴露风险评估和毒理药理研究奠定了基础，适用于药物、环境、食品等领域对经口暴露硫化汞或含硫化汞物质中汞绝对生物利用度的测定。