本发明涉及药品检测技术领域，具体涉及一种桂枝芍药知母汤中附子单酯型生物碱成分的检测方法，包括以下步骤：制备参照物溶液、供试品溶液，分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪进行分析，测定，记录色谱图，分别得到参照物色谱图谱和供试品指纹图谱，从而制得桂枝芍药知母汤中附子的标准指纹图谱；本发明操作方便、快捷，以其得出的相似度结果，对制剂指纹图谱进行评价，结论较为客观、准确，能够更全面、有效地对桂枝芍药知母汤中附子相关成分进行质量监控，保障临床用药安全。