本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体A354P，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，突变体A354P的比活力为36.71U/mg，较野生型提高了40.28％；而且突变体A354P可在600mmol/L葡萄糖的激活下最高达到190.29％的相对活力，相比野生型具有显著提高的葡萄糖耐受能力；突变体A354P对于虎杖苷也具有更强的水解能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。