公开(公告)号：CN118895267A

公开(公告)日：2024-11-05

申请号：CN202410786595.1

申请日：2024-06-18

申请人： 亚联糖业(广东)有限公司 ,  天津科技大学

发明人： 李玉 ,  张帆 ,  王茂军 ,  赵思江 ,  魏立坤 ,  李庆刚 ,  刘业学 ,  路福平

IPC分类号： C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/24 ,  C12P19/12 ,  C12R1/84

摘要： 本发明涉及酶工程技术领域，尤其涉及一种酶活力提高的蔗糖异构酶突变体P271F及其重组菌株和应用。本发明提供了一种蔗糖异构酶突变体，所述蔗糖异构酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述蔗糖异构酶突变体是在分散泛菌(Pantoea dispersa)来源的野生型蔗糖异构酶成熟肽的基础上，发生第271位氨基酸由Pro突变成Phe获得的。相同条件下，本发明突变体P271F的比活力为640.19U/mg，较野生型提高了22.6％；利用本发明中的蔗糖异构酶突变体进行催化实验，催化产物中异麦芽酮糖的纯度可达到99.97％。本发明为蔗糖异构酶工业化应用方面奠定了基础。

公开(公告)号：CN118879691A

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202410650601.0

申请日：2024-05-24

申请人： 天津科技大学

发明人： 路福平 ,  李玉 ,  王伟红 ,  魏立坤 ,  刘业学 ,  李庆刚 ,  王凤华

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N15/55 ,  C12N9/22 ,  C07K14/435

摘要： 本发明属于微生物与基因工程技术领域，具体涉及一种突变启动子PLC2及其应用。启动子PLC2的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，本申请通过在乳糖诱导启动子的基础上添加CRE元件，并对CRE序列进行突变，利用葡萄糖介导的CCR效应实现负调控蛋白阻滞RNA聚合酶的转录功能，使得添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达。本发明提供的启动子PLC2，在添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达，当葡萄糖的添加量为1.5％时，在12h和24h测得表达量相比于原始启动子Plac分别下降66％和63％。与此同时，在不添加葡萄糖只添加IPTG的情况下，PLC2仍然保持与原始启动子Plac相当的转录水平。

公开(公告)号：CN117487735A

公开(公告)日：2024-02-02

申请号：CN202311461344.8

申请日：2023-11-06

申请人： 天津科技大学

发明人： 路福平 ,  李庆刚 ,  李玉 ,  韩晓静 ,  白孟欣 ,  任绍东 ,  孙雪 ,  刘业学 ,  刘逸寒

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/57 ,  C12N15/75 ,  C12N9/48 ,  C12N9/50 ,  C12R1/07

摘要： 本发明属于基因工程和酶工程领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种用于生产蛋白酶的底盘菌株及其构建方法。本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌基因工程菌，该基因工程菌不表达解淀粉芽孢杆菌基因组上的六种胞外蛋白酶基因aprE，bpr，vpr，mpr，nprE，epr，胞外多糖基因簇eps，聚谷氨酸基因簇pgs，sacB基因，和双组分系统调节蛋白yycI基因。并且利用所述底盘菌株实现异源蛋白酶的高效表达，所述蛋白酶选自氨肽酶、碱性蛋白酶或角蛋白酶。

公开(公告)号：CN115125247B

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202210671305.X

申请日：2022-06-14

申请人： 天津科技大学 ,  山东隆科特酶制剂有限公司

发明人： 李玉 ,  路福平 ,  张莹 ,  王兴吉 ,  刘文龙 ,  李庆刚 ,  刘逸寒 ,  史超硕

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N9/56 ,  C12N1/21 ,  C12R1/11

摘要： 本发明通过对枯草芽孢杆菌来源的启动子分析改造获得了一种强度提高的新型组合启动子pα2‑α2。本发明还提供包含该组合启动子的表达载体、表达系统。本发明所述组合启动子用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可将碱性蛋白酶表达活性提高144％，为介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源碱性蛋白酶基因的表达奠定基础，推动碱性蛋白酶的高效表达及工业化生产。

公开(公告)号：CN116656660A

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202211706161.3

申请日：2022-12-29

申请人： 天津科技大学 ,  茂德科技(天津)有限公司

发明人： 李玉 ,  王茂军 ,  张宝伟 ,  聂培旭 ,  刘鹏 ,  史超硕 ,  李庆刚 ,  路福平

IPC分类号： C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/24 ,  C12P19/02 ,  C12R1/07

摘要： 本发明涉及酶工程技术领域，尤其涉及一种提高蔗糖异构酶热稳定性的突变体及其重组菌株。所述蔗糖异构酶突变体的氨基酸如SEQ ID NO.1所示。所述蔗糖异构酶突变体是在分散泛菌(Pantoea dispersa)来源的野生型蔗糖异构酶的基础上，发生第199位氨基酸由Ala突变成Leu获得的，其热稳定性较野生型提高了32.51％。利用本发明中的蔗糖异构酶突变体进行催化实验，催化产物中异麦芽酮糖的纯度可达到100％。本发明为蔗糖异构酶工业化应用方面奠定了基础。

公开(公告)号：CN115011582B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202210525603.8

申请日：2022-05-06

申请人： 天津科技大学

发明人： 李玉 ,  路福平 ,  李庆刚 ,  杨子璇 ,  王茂军 ,  史超硕 ,  刘逸寒

IPC分类号： C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12P19/02 ,  C12P7/22 ,  C12R1/84 ,  C12R1/19

摘要： 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体A354P，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，突变体A354P的比活力为36.71U/mg，较野生型提高了40.28％；而且突变体A354P可在600mmol/L葡萄糖的激活下最高达到190.29％的相对活力，相比野生型具有显著提高的葡萄糖耐受能力；突变体A354P对于虎杖苷也具有更强的水解能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。

公开(公告)号：CN116334025A

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202310064132.X

申请日：2023-01-17

申请人： 天津科技大学 ,  山东合成远景生物科技有限公司

发明人： 孙雪 ,  李庆刚 ,  谢真真 ,  何晋怀 ,  宗剑飞 ,  肖卫华 ,  刘传 ,  张文聪 ,  李玉 ,  路福平

IPC分类号： C12N9/12 ,  C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/61 ,  C12N15/31 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种RNA聚合酶β亚单位突变体及其应用。所述RNA聚合酶β亚单位突变体，是在野生型RNA聚合酶β亚单位(RpoC，NCBI Reference Sequences：NP_418415.1)的基础上，缺失第215位至第220位的6个氨基酸获得的，具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将其应用于生产2'‑岩藻糖基乳糖和3‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌中，能够大幅提高菌株在发酵时的活细胞数，提高了菌株在发酵环境中的耐受性，并且2'‑岩藻糖基乳糖或3‑岩藻糖基乳糖产量也大幅度提高。

公开(公告)号：CN115851679A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211227211.X

申请日：2022-10-09

申请人： 天津科技大学

发明人： 路福平 ,  刘逸寒 ,  李玉 ,  马向阳 ,  刘夫锋 ,  张会图 ,  王洪彬

IPC分类号： C12N9/54 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/07 ,  C12R1/19

摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及通过重叠PCR技术进行迭代饱和突变获得酶活力提高的碱性蛋白酶酶突变体及其制备与应用。本发明利用重叠PCR技术对克劳氏芽孢杆菌来源的碱性蛋白酶基因apr进行迭代饱和突变，筛选出低温下高活力的突变体，并在解淀粉芽孢杆菌中进行高效表达和制备，解决了低温洗涤环境下碱性蛋白酶活性较低的问题。

公开(公告)号：CN115806601A

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202211301250.X

申请日：2022-10-24

申请人： 天津科技大学

发明人： 李庆刚 ,  李玉 ,  程亚楠 ,  夏舒畅 ,  路福平

IPC分类号： C07K14/34 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N15/65 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明以一种新型的转录调控因子LysG突变体及受其调控的启动子为研究对象，特别涉及所述突变体在代谢工程中调控基因表达和高通量筛选方面的优势及应用，属于代谢工程领域。本发明通过对LysG进行点突变获得lysGE15D,A54D,I164V突变体，在组氨酸的调控下，突变体对下游基因的表达强度相对于野生型提高了7.5倍，即利用组氨酸的浓度可对下游基因进行更高强度的调控，因此可更好用于代谢工程调控以及应用于生产组氨酸菌株的高通量筛选。

公开(公告)号：CN115354059A

公开(公告)日：2022-11-18

申请号：CN202210402279.0

申请日：2022-04-18

申请人： 天津科技大学

发明人： 郭娜 ,  李玉 ,  屈琰 ,  李佳莉 ,  柴树权 ,  朱彤彤 ,  杨杰睿 ,  郁彭

IPC分类号： C12P21/06 ,  C07K1/34 ,  A61K8/64 ,  A61Q19/08 ,  A61K38/01 ,  A61P29/00 ,  A61P39/06 ,  A23L33/18

摘要： 本发明属于多肽提取技术领域，涉及一种连翘叶蛋白酶解多肽及其制备和应用，包括：首先，超声辅助碱溶酸沉法提取连翘叶蛋白，再经透析；经真空冷冻干燥，得到连翘叶蛋白粉；其次单酶酶解；最后超滤分离多肽。本发明以连翘叶粉为原料，首先采用超声辅助碱溶酸沉法提取其中的蛋白质，其次采用胰蛋白酶水解连翘叶蛋白，获取连翘叶多肽，生产过程绿色环保，产物具备较好抗氧化活性和抗炎活性，可应用于食品、保健品、药品、化妆品等领域，本发明可显著提高连翘叶利用价值。