一种用于提升烟草品质的微生物发酵方法，包括以下步骤：(1)以烤烟作为接种源接种于烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h；(2)将步骤(1)中的菌液接入到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，循环15‑25个周期，获得稳定的烤烟微生物菌群；(3)将步骤(2)获得的微生物菌群接种到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，得到微生物菌群的种子液；(4)对步骤(3)获得的菌液进行离心并收集菌体；(5)对步骤(4)收集的菌体进行洗涤；(6)对步骤(5)洗涤后的菌体进行重悬，得到菌悬液；(7)往烟叶上喷施步骤(6)的菌悬液，发酵6‑8天。本发明利用从烤烟中富集驯化的微生物菌群进行烟叶发酵，能够多方面提升烟草的品质。