本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种具有双/多重功能的非天然氨基酸及其重组蛋白、应用。本发明式I结构的非天然氨基酸可高效、定点的引入到蛋白的任意位点，通过快速、高效、条件温和的反应实现蛋白与包括荧光、核素、药物、聚乙二醇(PEG)以及核酸等效应分子的定点偶联，制备定点修饰且质量均一的双/多偶联物，该偶联物具有低成本，低免疫原性，生产简单的潜在优势。双/多重功能重组蛋白可应用于高信噪比肿瘤成像，双模态肿瘤诊疗一体化以及抗体药物偶联介导地肿瘤杀伤等临床应用。