本发明公开了一种直扩型Bst DNA聚合酶及其制备方法与应用。本发明公开的直扩型StoL3Bst是野生型BstDNA聚合酶经截短突变、融合非特异性双链DNA结合蛋白结构域，并采用适当长度的连接子进行连接而成。本发明StoL3Bst可大幅提高DNA聚合酶的延伸速率和抑制剂耐受能力，可耐受高浓度的常见抑制剂，可应用于各种来源的、组成复杂的样本检测，还可直接利用血液样本进行免提取LAMP或qLAMP检测，使得LAMP相关检测更加便捷。本发明还公开了一种qLAMP反应试剂盒，检测特异性高、重复性好，适用于粗提取核酸样本的快速检测，可应用于微生物检测、食品掺假检测、动植物疾病筛查等。