本发明涉及生物技术领域，且公开了一种Bt蛋白Cry53A，所述氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该Bt蛋白Cry53A及其基因和应用，提供Cry53A蛋白是一种Bt蛋白，对草地贪夜蛾有极强的杀害毒力，将其用于制备转基因植物，能够对抗草地贪夜蛾对作物的危害，并降低农药的使用量，降低成本，减少环境污染，在本发明的效果验证试验过程中，也没有发现害虫对该蛋白产生抗性的情况。因此，本发明的Bt蛋白Cry53A具有重要的经济价值和应用前景，适合大规模应用于提高植物的抗虫性中。