本发明属于生物发酵工程技术领域，提供了一种提高多杀菌素摇瓶发酵水平的方法，其主要包括发酵前在发酵培养基中添加前体物质，在发酵至144‑168h时检测氨基氮含量并加入复合氮源两种方式，发明人发现同时采用上述两种措施可有效缩短目标产物的合成时间，提高多杀菌素的摇瓶发酵水平，可持续为发酵过程中的菌丝生长和产物合成提供氮源，有利于多杀菌素的积累。相比未添加前体、复合有机氮源的情况，本发明技术方案中多杀菌素的产率提高了45％以上，大幅提高了多杀菌素的发酵单位，为后期生物大发酵提供了可能。