本发明属于荧光传感技术领域，具体涉及一种双金属离子信号放大的铜纳米簇‑香豆素比率荧光传感器及其应用。本发明以Ce3+诱导谷胱甘肽稳定的铜纳米簇的聚集诱导效应，使铜纳米簇的荧光显著增强且使过氧化氢对铜纳米簇的荧光猝灭效率显著提高，并在Fe2+的催化作用下，通过Fe2+与过氧化氢之间的芬顿反应促使无荧光的香豆素转变成强荧光的7‑羟基香豆素，构建了以铜纳米簇和香豆素为荧光探针的比率型荧光传感器，并将其用于过氧化氢和葡萄糖的灵敏检测。该荧光传感器的制备方法简单、耗时短，用于过氧化氢和葡萄糖的检测时具有高的灵敏度，可实现过氧化氢和葡萄糖的原位可视化检测。