本发明公开了一种1,8萘酰亚胺衍生物及其制备方法与应用。本发明以4‑溴‑1,8‑萘酐为起始原料，与5‑取代苯并三唑进行亲核取代反应，得到中间体a‑c；中间体a‑c与3种不同的二胺化合物反应形成萘酰亚胺，得到式(Ⅰ)所示的目标产物1a‑3c。其中：R1为氢、氟或氯；R2为二甲氨基、二乙醇氨基或哌嗪基。本发明所有目标化合物经过CCK‑8实验技术评价其不同肿瘤细胞的细胞毒性，并将活性较好的化合物3a用于与人类B淋巴细胞瘤‑2原癌基因(Bcl‑2)DNA序列作用的研究。此类化合物能够很好地作用于人类原癌基因Bcl‑2Pu39DNA富含鸟嘌呤G的序列，能够稳定Bcl‑2G‑四链体结构。这项发明对发现新的抗肿瘤小分子药物，尤其为1,8萘酰亚胺衍生物靶向Bcl‑2的临床药物研发提供了方向。