本发明属于酶的基因工程技术邻域，具体涉及一种酶活性和热稳定性提升的β‑木糖苷酶突变体及其制备应用。本发明通过分子生物技术手段获得克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)野生型的β‑木糖苷酶基因，利用易错PCR技术对β‑木糖苷酶基因进行随机突变，得到β‑木糖苷酶突变体S51L和其编码的基因xylm，重新构建重组质粒，并实现了其在大肠杆菌、毕赤酵母菌和枯草芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得酶活力和热稳定性能提高的β‑木糖苷酶。