本发明涉及生物墨水材料技术领域，具体涉及一种可食用3D打印生物墨水及其制备方法和在培育肉中的应用。本发明提供一种生物墨水，所述生物墨水的制备原料包括果胶、谷氨酰胺转氨酶、第一蛋白组分和第二蛋白组分；其中，所述第一蛋白组分为明胶和/或胶原蛋白；所述第二蛋白组分为鱼精蛋白。该生物墨水在进行3D打印时无需光引发剂，可食用，具有良好的生物相容性、可打印性和稳定性，支持细胞三维立体生长，且兼具调节肠道菌群、促进胆固醇代谢的功效，可在多种细胞培养装置中进行细胞扩增，用于生物培育肉的生产加工，在食品科学、细胞农业、生物医疗等领域具有广阔的应用前景。