本发明公开了一种利用PCR产物条带数量差异鉴定达氏鲟性别方法，公开了一段达氏鲟基因组序列，利用该序列可以进行达氏鲟的雌雄鉴定。本发明还公开了在达氏鲟雌雄基因组DNA均可扩增出的阳性参考DNA片段。引物为提供的序列设计而成，利用引物对待测达氏鲟DNA进行PCR扩增，当扩增结果的产物在琼脂糖凝胶上显示的结果为3个条带时，则待测达氏鲟为雌性，当扩增结果的产物在琼脂糖凝胶上显示的结果为2个条带时，则待测达氏鲟为雄性。或者当扩增结果片段出现1402bp条带时，则待测达氏鲟为雌性，不出现1402bp条带时为雄性达氏鲟。本发明提供的达氏鲟序列片段可以快速有效鉴定达氏鲟雌雄，有效提高达氏鲟养殖效率和养殖合理性，人为调节养殖达氏鲟雌雄比例。