本发明公开了一种模拟移动色谱纯化红缘层孔菌多糖的方法，涉及食品工业领域。该方法包括以下步骤：(1)对红缘层孔菌进行脱脂，除蛋白后，提取得到多糖提取液；(2)利用模拟移动色谱对所述多糖提取液进行纯化，得到纯化液；(3)所述纯化液浓缩后干燥，即得精制红缘层孔菌多糖。利用本发明提供的方法纯化得到的红缘层孔菌多糖，纯度和收率均较高，纯度可达60％～80％，收率可达80～90％，并且本发明纯化得到的红缘层孔菌多糖多糖还具有激活巨噬细胞产生NO的作用。