本发明公开了一种竞争型草鱼卵泡刺激素检测试剂盒及应用。属于生物技术领域。包括：草鱼FSHβ抗体、草鱼FSHβ蛋白标准品、FSHβ示踪剂、涂板液、清洗液、阻断液、催化液、终止液、荧光检测剂A、荧光检测剂B。本发明还公开了检测方法，本发明试剂盒以生物素标记的草鱼FSHβ抗原为示踪剂，采用竞争性荧光免疫方法对草鱼FSH进行定量检测，具有更高的检测灵敏度和特异性，并且成本低，所得检测数据稳定、准确。可以检测草鱼血清、垂体裂解液或培养液等样品中的卵泡刺激素浓度，检测半效应浓度可以达到2.63ng/mL，为草鱼卵泡刺激素的研究提供了有效的检测手段。