本发明公开了一种用于关节软骨缺损修复的生物制剂、制备方法及其应用。制剂包括活性成分mRNA，如SEQ ID NO：1所示或者相似度达90％以上的序列；方法包括合成DNA片段，将DNA片段克隆至表达质粒获得重组质粒，将重组质粒转入宿主细胞获得重组细胞，从重组细胞中提取质粒，PCR扩增获得DNA模板，利用DNA模板构建RNA体外合成体系并进行RNA体外合成获得活性成分mRNA；在用于软骨修复的制药中的应用。本发明使用体外转录法合成化学修饰的FoxO1mRNA基因，将制剂注射于关节软骨缺损处，能促进内源性间充质干细胞成软骨分化；其生物活性优良，在组织工程中具有应用价值。