本发明公开了一种外泌体分离纯化方法，包括以下步骤：将CD36适配体修饰到磁珠表面，得到CD63适配体磁珠；将细胞上清液与CD63适配体磁珠混合反应，通过CD63适配体磁珠捕获外泌体，得到CD63适配体磁珠‑外泌体吸附物；对CD63适配体磁珠‑外泌体吸附物进行固液分离，得到磁珠吸附物；对得到的磁珠吸附物进行洗涤，得到提纯后的外泌体。基于外泌体的特性，可以有效克服常规的外泌体富集技术存在的对脂蛋白等杂质共分离的缺陷，提高富集外泌体的纯度，配合后续的洗脱液，可是实现外泌体的无损释放，减低了对外泌体结构的破坏，保证了外泌体结构的完整性，不影响下游分析，本发明公开的方法真个分离周期用时短，CD63适配体也可以在体外快速批量合成，成本低。