本发明涉及生物检测技术，具体涉及一种神经酰胺衍生化测定方法，包括以下步骤：S1衍生化反应：将待测物与6‑氨基喹啉基‑N‑羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)衍生试剂反应；S2色谱分离：采用C18色谱柱分离；S3计算：荧光或紫外检测，外标法计算样品中神经酰胺含量。本发明与其他衍生化方法相比，不需要先将神经酰胺进行脱酰基反应，本发明将神经酰胺标样或样品直接与AQC进行衍生化反应，具有操作简便、样品衍生化步骤少、反应时间短衍生化产物稳定的优点。