提供一种口腔鳞状细胞癌辅助诊断标志物，其由神经酰胺Cer(d28:0)、神经酰胺Cer(d30:0)、溶血磷脂酰胆碱LPC(16:0)、磷脂酰胆碱PC(40:6)和鞘磷脂SM(d34:1)组成。本发明还提供一种口腔鳞状细胞癌辅助诊断模型构建方法，其包括：步骤一、获取训练病例集；步骤二、采集受试者的血清样本，对血清样本进行超高效液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱串联高分辨质谱分析，得到患病受试者和健康受试者的多个差异脂质代谢物；步骤三、利用多元统计和受试者工作特征曲线，确定口腔鳞状细胞癌的辅助诊断模型。本发明在诊断口腔鳞状细胞癌上具有实现早期诊断、微创、准确度高的优点。