本发明提供了一种反应型不粘轮层间黏结剂及其制备方法和应用，涉及道路工程技术领域。本发明提供的反应型不粘轮层间黏结剂，包括独立分装的A组分和B组分；所述A组分与B组分的质量比为1～6：1；所述B组分的固含量为5～40％；以质量分数计，所述A组分包括：基质沥青40～60％，固体改性剂3～5％，液体改性剂2～6％，乳化剂0.7～1.5％，水30～50％；以质量分数计，所述B组分包括：有机硅类乳液0～5％，聚乙烯蜡类乳液5～10％，特种单体0～5％，水85～95％。本发明提供的反应型不粘轮层间黏结剂粘结性能好、破乳速度快、工后不粘轮、环保性能好，能够改善施工效率，提升层间粘结性能，延长路面使用寿命。