本发明属于医药检测技术领域，具体涉及高效液相色谱法同时测定左卡尼汀中五种杂质的方法。所述的液相色谱法同时测定左卡尼汀中五种杂质的方法，包括以下步骤：色谱条件：色谱柱：以替考拉宁糖苷配基为填充剂；流动相：4.5~5.5mmol/L乙酸铵溶液‑乙腈（87:13~83:17），流速：0.5~0.7mL/min，溶剂：水；制备对照品溶液；制备供试品溶液；制备系统适用性溶液；制备自身对照溶液；测定方法：分别将以上溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图。本发明提供的液相色谱法同时测定左卡尼汀中五种杂质的方法，简便快捷、灵敏度高、重现性好，解决检测中溶剂干扰的问题，有效控制左卡尼汀的质量。