本发明属于生物技术领域，具体涉及一种3D生物打印的人工仿生胰岛及其制备方法和用途。针对目前缺乏能治疗I型糖尿病、治疗效果持久、并且免疫原性低的人工仿生胰岛的问题，本发明提供了一种3D生物打印的人工仿生胰岛，由人胰腺β细胞经3D生物打印而制成，所述的人胰腺β细胞是由人尿液上皮样细胞来源的iPSCs诱导分化得到。本发明还在打印的人胰腺β细胞中加入了MVF，MVF能使人工仿生胰岛形成血管化网络结构，治疗效果更好。本发明还提供了人工仿生胰岛的制备方法，以及其在异种移植中的应用。本发明的3D打印方法操作简单，取材易得，制得的人工仿生胰岛移植安全性高，为糖尿病的治疗提供了一种新的思路和方法。